Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile
热敏型尿嘧啶核糖基酶
产品概述
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 热敏UDG酶可催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。本酶可作用于含有dU的单链或双链DNA,对RNA无活性。
在分子诊断中(如:PCR、qPCR、RT-PCR和RT-LAMP等),热敏感UDG可以保证其扩增的效率和特异性。对于分子诊断而言,保持高检测特异性和感度是非常重要的,当目标分子浓度很低的时候,即使是微量的DNA污染物也会导致诊断分析的感度降低。
UDG在环境温度中(25~37℃)具有良好的活性,U&G UDG既保证了PCR诊断所需的效率和感度,又防止了气溶胶污染的假阳性结果。不同于其他商业化的耐热UDG,U&G UDG是一种不可逆的热灭活UDG。完全适用于one-step RT-PCR反应,且可以对PCR产物进行后续的各种分析测试(例如PCR产物的电泳、测序)。
产品组分

产品优势
可完全且不可逆的热失活;
热失活时无需添加其它组分或抑制剂;
实验案例
Heat-labile Uracil DNA Glycosylase 来源于大肠杆菌菌株中重组表达月光鱼UDG酶的突变体,对高温敏感,55℃ 10 min 就可以使酶不可逆失活。
为了测试UDG的失活温度是否适用于one-step RT-PCR,使用常见的RT温度55°C加热不同时间,比较残留的UDG活性。

Figure A. U&G UDG 在55°C加热10min后完全失活
为了测试U&G UDG的降解PCR产物的能力,分别使用含有含有dU和不含dU的模板DNA(1.0E+07 copies),并在PCR体系中选择添加1个单位的U&G UDG。

Figure B. U&G UDG可快速降解含U的模板污染,且不影响不含U模板的扩增。
保存温度
本酶在-20°C下可至少储存2年。4°C下可以储存6个月。可以冻融数次,保持活性不受影响。
暂无数据
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